Czym jest i w jakich badaniach używana jest Operetta firmy Perkin Elmer?
Dr Joanna Roszak: Operetta jest to urządzenie do wieloparametrycznej analizy obrazów HCA (ang. High Content Analysis). Jest to zautomatyzowany mikroskop wyposażony w kamerę wysokiej rozdzielczości, w optykę konfokalną umożliwiający obrazowanie utrwalonych i żywych komórek. Zarejestrowane obrazy poddawane są wieloparametrycznej analizie na komputerze i dzięki temu możemy uzyskać wiele informacji z pojedynczych komórek w krótkim czasie.
Urządzenie to wykorzystywane jest głównie do badań przesiewowych in vitro. W naszej pracy skupiamy się głównie na ocenie wpływu różnych substancji np. przeciwnowotworowych na aktywność biologiczną komórek umieszczonych na płytkach wielodołkowych (np. 384-dołkowych). Znaczną część naszej działalności zajmuje nanotoksykologia, gdzie oceniamy działanie nanocząstek na komórki, ich reakcje z różnymi typami komórek.
Jakie innowacyjne rozwiązania posiada taka aparatura?
Jaką przewagę nad innymi urządzeniami posiada taki sprzęt?
Dr Joanna Roszak: Przede wszystkim sprzęt ten jest w pełni automatyzowany. Posiadamy nie tylko zautomatyzowany mikroskop, ale też stację dozującą, która umożliwia rozporcjowanie komórek na płytki wielodołkowe, a także robota, który przenosi płytki na stacje dozującą, a następnie do mikroskopu. Wszystko to jest rejestrowane za pomocą czytników kodów. Operator, w tym czasie może poświęcić swój czas na coś innego, co znacznie skraca czas pracy. W przypadku tradycyjnych testów biochemicznych najczęściej badamy jeden parametr, natomiast przy użyciu Operetty z jednej komórki możemy uzyskać ogromną ilość danych, co umożliwia głębszą analizę mechanizmów działania badanego czynnika.
Ponadto Operetta posiada optykę konfokalną, dzięki czemu można uzyskać obrazy o większym kontraście i rozdzielczości. Możemy również wykonywać obrazowanie poszczególnych cienkich warstw i stworzyć obraz 3D, żeby np. zlokalizować nanocząstki w komórce. Kolejną zaletą takiego sprzętu jest to, że analiza jest obiektywna i powtarzalna. Do tradycyjnych testów potrzebny jest mikroskop wyposażony w kamerę, a obecność człowieka jest niezbędna, gdyż to on decyduje, który obiekt wybrać do analizy. Tutaj decyduje oprogramowanie. Analiza wykonywana jest za pomocą specjalistycznego oprogramowania Harmony, w którym zaprojektowany dla danego doświadczenia czy testu protokół analizuje obrazy przetwarzając zadane algorytmy. Korzystając z zaprojektowanego protokołu, analiza będzie niezależna od pory dnia i osoby obsługującej urządzenie, w przeciwieństwie do tradycyjnej analizy mikroskopowej.
Inną zaletą tego typu urządzeń jest to, że badania mogą być wykonywane w warunkach fizjologicznych dla badanych komórek, co zwiększa istotność uzyskanych wyników w porównaniu do wyników uzyskanych metodami biochemicznych np. Western blot, ELISA.
Jaki jest koszt takiego urządzenia?
Koszt takiego urządzenia zależy od wyposażenia. Cena katalogowa Operetty z opcją optyki konfokalnej to koszt około 845 tysięcy złotych. Bez tej opcji jest oczywiście tańszy.
Od kiedy w Instytucie prowadzone są badania na nim?
Dziękuję za rozmowę.
red. Magdalena Zając
