Znajdź nas na:

FTA cards – izolacja DNA na wariackich papierach?

25.09.2015 izolacja DNA

Pobranie od pacjenta materiału przeznaczonego do dalszych analiz w laboratorium to pierwszy i kluczowy etap badania, którego nieprecyzyjne wykonanie może zaważyć na dalszych losach prawidłowego wyniku. Firma GE Healthcare oferuje wygodne rozwiązanie, ułatwiające przeprowadzenie analizy molekularnej już od samego początku: specjalne karty FTA, czyli matryce pokryte odpowiednimi reagentami, dedykowane do wygodnego pobrania i oczyszczenia próbek, takich jak krew czy wymaz z błony śluzowej policzka.

Karty te wykorzystują patentowaną technologię Whatman, dzięki której możliwe jest zarówno wygodne pobranie próby, jak i transport, przechowywanie i analiza związanych z jej matrycą kwasów nukleinowych w temperaturze pokojowej. W przypadku zwykłych kart FTA DNA przez cały czas znajduje się na matrycy karty, która może być bezpośrednio użyta do późniejszych preparacji. Natomiast karta FTA do elucji poddawana jest oczyszczaniu, w którego efekcie otrzymujemy wodny roztwór DNA, gotowy do dalszych analiz. Celulozowe matryce pokryte są reagentami, które umożliwiają lizę pobranych komórek, denaturację białek i ochronę DNA przed nukleazami – jednym słowem, standardowe składniki zestawów do izolacji DNA. Jednocześnie włókna matrycy stanowią „pułapkę” dla uwolnionych w ten sposób kwasów nukleinowych.

Tkanki płynne, jak np. krew, nanosi się na matrycę pipetą, w objętości od 40 do 125 μl. W celu analizypróbek z wewnętrznej strony policzka stosuje się natomiast wymazówki, które następnie przykłada się, pocierając, do powierzchni karty. Można je także wykorzystać do analizy tkanek takich jak np. liście, w tym przypadku należy je delikatnie zgnieść przy użyciu tłuczka czy moździerza, a następnie nanieść na matrycę. Podobnie jest w przypadku całych owadów, które można przed rozpoczęciem procedury poddać dokładniejszej homogenizacji i rozdrobnieniu. Należy pamiętać, że przed rozpoczęciem oczyszczania karty muszą całkowicie wyschnąć.

W ofercie znajdują się m. in. karty indykatorowe, które zmieniają kolor z różowego na biały po nałożeniu pobranej próby, co ułatwia jej zlokalizowanie na matrycy – jest to rozwiązanie szczególnie przydatne w przypadku materiałów bezbarwnych, takich jak ślina czy hodowle komórkowe (na zdjęciu).

Produkt ten jest dużym ułatwieniem w kwestii pobierania próby, dużą wygodą jest też możliwość manipulacji w temperaturze pokojowej, w której DNA jest wciąż stabilny. Co więcej, matryce mogą być wykorzystane do pobrania większości rodzajów materiałów biologicznych (krew, nabłonek, hodowle komórkowe, bakterie...), a „schwytany w pułapce” kwas nukleinowy jest stabilny i w mniej niż pół godziny gotowy do dalszych analiz, takich jak PCR, RFLP czy klonowanie. Mimo, że cały proces przygotowania materiału dzięki matrycy FTA jest dużo szybszy, z pewnością nie odbywa się on „na wariackich papierach” – procedura ta, choć jest dużym ułatwieniem, wciąż charakteryzuje się wysoką wydajnością i skutecznością, porównywalnie ze standardowymi metodami.

 

źródło: http://www.gelifesciences.com

Magdalena Sokulska

Komentarze napędza: Disqus

Pasaż laboratoryjny

articles

Laboratoria w Polsce

Mając na względzie ochronę i bezpieczeństwo Twoich danych osobowych, firma Bio-Tech Media sp. z o.o., przykładając szczególną wagę do ich ochrony, dostosowała swoje zasady ich przetwarzania do obowiązującego od dnia 25 maja 2018 roku Rozporządzenia Parlamentu Europejskiego i Rady (UE) z dnia 27 kwietnia 2016 r. nr 2016/679

Nasza zaktualizowana polityka prywatności wprowadza wszystkie pozytywne zmiany, w tym sposób, w jaki zbieramy, przetwarzamy i przechowujemy Twoje dane osobowe. Przedstawia sposób, w jaki możesz się z nami skontaktować, aby skorzystać z przysługujących Ci praw.

W tej chwili nie musisz podejmować żadnych działań, ale jeśli chcesz dowiedzieć się więcej, zapoznaj się z naszą polityką prywatności.

Zapoznaj się z naszą polityką prywatności ›
Rozumiem