• /
• Usługi

Centrum Innowacji, Transferu Technologii i Rozwoju Uniwersytetu (CITTRU) Uniwersytet Jagielloński

Zadaj zapytanie ofertowe

Adres

ul. Czapskich 4 31-110 Kraków

Telefon +48 12 663 38 32

Faks +48 12 663 38 31

E-mail cittru@uj.edu.pl

Strona http://www.cittru.uj.edu.pl

Kategorie: innowacja, technologia, centrum innowacji

• Profil
• Lista usług
• Usługa

kolagen

Znacznik fluorescencyjny do barwienia kolagenów

(PROJEKT NR P-089)

Kolagen jest białkiem macierzy zewnątrzkomórkowej, które stanowi główny białkowy składnik organizmów ssaków. Kolagen występuje w prawie 30 odmianach, a jego fizjologiczne funkcje to utrzymanie mechanicznej odporności tkanek oraz wpływ na adhezję, migrację, proliferację i metabolizm komórek w tkankach. Denaturacja kolagenu zachodzi podczas starzenia organizmów i prowadzi do utraty własności mechanicznych tkanek, natomiast wrodzone zaburzenia w jego syntezie są przyczyną poważnych chorób, takich jak pęcherzowe oddzielanie się naskórka, pemfigoid klasyczny, zespół Alporta, zespół Ehlersa-Danlosa i inne. Kolagen jest wykorzystywany terapeutycznie do wytwarzania substytutów tkankowych, które stosuje się podczas regeneracji uszkodzonych tkanek w celu fizycznego wspierania komórek oraz regulacji ich namnażania, różnicowania i morfogenezy.

Spolimeryzowany kolagen tworzy w tkankach zwierzęcych włókna, które są odpowiedzialne za mechaniczną integralność tkanek oraz pełnią rolę w rozwoju zarodkowym, gojeniu ran, starzeniu i innych ważnych procesach biologicznych, a także w wielu stanach chorobowych. Możliwość detekcji i obserwacji włókien kolagenowych metodami fluorescencyjnymi może mieć zastosowanie w diagnostyce medycznej oraz badaniach naukowych. Mikroskopowa identyfikacja włókien kolagenowych znajduje zastosowanie w badaniach macierzy zewnątrzkomórkowej i substytutów tkankowych. Oferowana technologia pozwala na obserwację kolagenów in vivo w nienaru-szonych tkankach, a także w tkankach utrwalonych i w innych materiałach zawierają-cych kolagen.

Większość istniejących metod znakowania kolagenów, jak barwienie metodą srebrową czy kontrastowanie do mikroskopii elektronowej, nie nadaje się do barwienia tkanek żywych, a techniki możliwe do stosowania przyżyciowo (np. autofluorescencja) są niespecyficzne lub wymagają kosztownej aparatury. Oferowany znacznik fluorescencyjny jako jedyny umożliwia specyficzną wizualizację i badanie trójwymiarowej struktury sieci włókien kolagenowych in situ w żywych tkankach. Barwienie kolagenów za pomocą oferowanego znacznika polega na tworzeniu wiązania niekowalencyjnego i pozwala na uzyskanie wybiórczej fluorescencji struktur zawierających kolagen lub kolageny, zarówno w tkankach żywych jak i utrwalonych, w celu stworzenia trójwymiarowych obrazów o wysokiej rozdzielczości lub w celu dokonania pomiarów metodami mikroskopowymi i cytometrycznymi, takimi jak mikroskopia fluorescencyjna, konfokalna, laserowa cytometria skaningowa, cytometria przepływowa i podobne.

Oferowany znacznik fluorescencyjny jest przedmiotem zgłoszenia patentowego, a jego właściwości zostały potwierdzone eksperymentalnie, zarówno w barwieniu pojedynczych fibryli spolimeryzowanego kolagenu in vitro, jak i w badaniach specyficznego wiązania do włókien kolage-nowych w żywych tkankach, m.in. na powierzchni mięśnia szkieletowego i w naczyniach krwionośnych. Ponadto potwierdzona została przydatność znacznika do badania materiałów na przykładzie wizualizacji struktury biomateriału zawierającego kolagen używanego w leczeniu ran oparzenio-wych (na fot. obok).

Dalsze badania nad rozwojem przedstawionej technologii są prowadzone na Wydziale Biochemii, Biofizyki i Biotechnologii Uniwersytetu Jagiellońskiego. Obecnie Centrum Innowacji, Transferu Technologii i Rozwoju Uniwersytetu poszukuje podmiotów zainteresowanych uzyskaniem licencji na zasto-sowanie opisanej technologii.

Dalsze informacje:

dr Radosław Rudź                                       

  tel. 12 663 3832, fax: 12 663 3831

Specjalista ds. Transferu Technologii                 

 e-mail: radosław.rudz@uj.edu.pl

CITTRU, Uniwersytet Jagielloński

www.cittru.uj.edu.pl

____________________________________________________________________________________________________

Fluorescent probe for collagen staining

(project no. P-089)

Collagen is an extracellular matrix protein that is the main protein component of mammalian organisms. Collagen is present in nearly 30 varieties, and its physiological function is maintaining the mechanical resistance of tissues, but also influence on adhesion, migration, proliferation and metabolism of cells in tissues. Denaturation of collagen occurs with aging of organisms and leads to loss of mechanical properties of tissues; several serious diseases are caused by congenital abnormalities in the collagen synthesis, including epidermolysis bullosa, Alport syndrome, bullous pemphigoid, Ehlers-Danlos syndrome and other. Collagen is used therapeutically to produce tissue substitutes, which are used during the regeneration of damaged tissues to provide physical support to the cells and hence regulate their proliferation, differentiation and morphogenesis.

Polymerized collagen in animal tissues forms fibres, which are responsible for the mechanical integrity of tissues and play role in embryonic development, wound healing, aging and other important biological processes, as well as in many morbid conditions. Methods of detection and observation of collagen fibres with fluorescent labelling can be used in medical diagnostics and research. Microscopic identification of collagen fibres is used in the studies of extracellular matrix and tissue substitutes. The offered technology allows for observation of collagen in vivo in intact tissues, as well as in fixed tissue and other collagen-containing materials.

Most of the existing methods of collagen labelling, like silver staining and electron microscopy contrasting, are not suitable for living tissues, and the techniques available for vital stain (e.g. autofluorescence) are non-specific or require expensive equipment. The offered fluorescent probe is the only one that allows specific visualization and study of three-dimensional structure of collagen fibre network in situ in living tissues. Staining of collagen with the offered probe involves creation of non-covalent binding and allows for selective fluorescence of structures containing collagen or collagens, both in the living and fixed tissues, in order to create three-dimensional high resolution images or to make measurements with microscopic and cytometric methods, such as fluorescent or confocal microscopy, laser scanning cytometry, flow cytometry and other.

The offered fluorescent probe is subject to patent application and its properties have been confirmed experimentally, both for staining of individual collagen fibres in vitro and in studies of specific binding to the collagen in living tissues, e.g. on the surface of skeletal muscle and in blood vessels. In addition, the probe was proved useful for material testing – the working example was visualisation of the structure of collagen-containing biomaterial used in the treatment of burn wounds (see the photograph).

The research and development efforts related to this technology are continued at the Faculty of Biochemistry, Biophysics and Biotechnology of the Jagiellonian University. Currently, the Centre for Innovation, Technology Transfer and University Development (CITTRU) is looking for companies and institutions interested in obtaining a licence for the technology described above.

More information:

Radoslaw Rudz, Ph.D.

Project Development Manager

phone: +48 12 663 38 32

e-mail: radoslaw.rudz@uj.edu.pl